Urostyla, paramécies DIC et Fluorescence

[Jean-marc]

Bonjour,

Je continue mes essais sur la prise de ciliés en mouvement en fluorescence.

2 espèces étaient présentes, Urostyla (ou similaire) et paramécie.

Les photos en DIC, ne posent généralement pas de gros problèmes, mais les photos en fluorescence épiscopique, ne sont pas encore suffisamment net du fait des temps de pose à 1/20-1/30; 400 isos.
Led cree XHP50 19W; 1600lm
l'essai avec une Led Cree XHP70 32W 2500lm, ne m'a rien amené de plus pour l'instant, mais c'était une à 4500°K
Des essais avec une 6000°K se feront également.

De prochains essais en fluorescence diascopique devraient amener plus de lumière je pense (Cree XHP70).

Les 2 ensemble, pour juger de la différence de taille, la paramécie est petite.
Remarquez la gourmandise de Urostyla !

Urostyla DIC40 12-02-17a.jpg (254.93 Kio) Vu 8055 fois

Urostyla seul, et déjà malade à cause des fluorochromes

Urostyla DIC16 12-02-17c.jpg (252.66 Kio) Vu 8056 fois

La même mais en fluo, + acridine Orange, les implantations cilaires sont visibles

Urostyla fluo Acryd 16 12-02-17a.jpg (221.99 Kio) Vu 8053 fois

Paramécie et d'autres ciliés en mouvement, l'image est un peu flou, il faudrait figer à au moins 1/150e à ce Gx

paramecie Acryd fluo16 12-02-17a.jpg (197.86 Kio) Vu 8050 fois

JM

[Maraussan]

Pourquoi ne pas utiliser des Led professionnelles Cree CXA3070 en 6500° Kelvin ?

[Jean-marc]

Bonjour Alain,

Bonne idée.
J'ai déjà regardé les XCA, et je modifie un Dialux 22 avec un XCA1304.
Les problèmes de la XCA 3070 :
un diamètre de 23mm totalement incompatible avec mon collecteur, puisque mon diamètre optimal est vers les 6mm. La très grande majorité de la lumière serait perdue.
Accessoirement le voltage de 40V dont je ne dispose pas sur mon micro, mais sur une alim déportée.

Je prends toutes idée

JM

[Maraussan]

Les problèmes de la XCA 3070 :
un diamètre de 23mm totalement incompatible avec mon collecteur, puisque mon diamètre optimal est vers les 6mm. La très grande majorité de la lumière serait perdue.

Au pire, on concentre à 6mm avec un Light Pipe cassegrain, collé sur la surface de la led, mais je reconnais que la solution commence à devenir technique...

[Jean-marc]

Oui c'est une très bonne idée, d'ailleurs cela existe sur cette pièce de Leitz, le Variolum, qui avait son utilité sur des éclairages halogène pour régler la t° de couleur et l'homogénéité de la lumière:

Dscn2358.jpg (21.09 Kio) Vu 8001 fois

Variolum 01.jpg (247.75 Kio) Vu 8005 fois

Mais comme tu le dis, cela devient compliquer de trouver les bons éléments (et la place dans le boitier) pour y arriver.
J'ai vu le système de pipe en sortie d'une lampe Ikéa pour amener la lumière au plus près de l'objet pour de l'épiscopie.

JM

[Maraussan]

Au pire, et sous réserve de filtrer les IR et de (très très) bien ventiler le boitier, reste la solution du micro-tube halogène 230 volt en puissance de 1000 Watt, pour torche OSRAM modèle SLG 1000. C'est une solution qui marche du feu de dieu depuis des décennies, pour des cas spéciaux. Le risque est de ce bruler. Mais en général, un tube pilote de faible puissance précède l'utilisation anecdotique du tube 1000W. Si intéressé, je dois avoir les références qq part ...
La mise en œuvre est rapide : un simple support en Stéatite, un gros ventilo.

[Vardar]

Jean-Marc merci pour ces jolies photos. Je m'étonne que les implantations ciliaires soient marquées par l'acridine orange. On voit normalement des structures vésiculaires de style endosomes, lysosomes, phagosomes (chgt de couleur en fonction du pH).
J'ai moi même essayé de faire fonctionner ma fluo sur l'axiophot mais je fais sauter les plombs à chaque fois
Une alternative que j'étudie est l'utilisation du Flutax en fluorescence qui colore spécifiquement les structures ciliaires en solution alternative de la coloration argentique.

[Bernard-J]

Je m'étonne que les implantations ciliaires soient marquées par l'acridine orange

Bonsoir Phil, tous,

Je me suis posé la même question !
Bonne idée le Flutax - ne pas confondre avec l'antidépresseur
Pourrais-tu nous en dire plus sur ce dérivé du taxol ?
Quel filtres d'excitation/émission doit-on utiliser ?
Est-ce qu'on peut colorer les proto sans les fixer auparavant ?
Si tu as déjà quelques photos à nous montrer...

Bernard

[sciroccoblow]

Superbes images

Je ne me souviens plus, ta fluo est LED aussi ?

@Vardar : ton alim fluo doit être HS, si tu es sportif tu peux la tester (je crois que la tension est de quelques miliers de volts, sans ampèrage)

[Jean-marc]

Je suis d'accord avec toi Phil, aussi je me demandais si je n'écrivais une co..!
Pourtant cela semble être cela, à moins que tu ais une autre idée ?
Peux tu nous en dire plus sur le Flutax ?

Merci Fabien, oui c'est une LED 19W, 6000°K

JM