Génétique moléculaire - Épisode 2

[Eddy]

Lire l'article (portail)

[Eddy]

Re,

J'oubliais : pour ceux qui prennent l'histoire en chemin, je vous rappelle qu'il y a déjà eu un épisode 1.

[BelialL]

Magnifique !!!

Superbe présentation encore une fois et comme tu l'a écrit, c'est en effet un peu plus compliqué que l'épisode 1.

C'est pourquoi j'ai besoin de quelques explications supplémentaires :

- Concernant la réaction de PCR, les copies se font donc en sens inverse, mais comment la copie s'arrête-t-elle ?
Par exemple pour le brin 5'->3', l'amorce (GAGACGAATAAGGTCC) permet la copie de la séquence d'intérêt qui se pousuit ensuite à l'autre amorce (TATCAACCCCAAAACTTT) mais comment être sûr que la copie ne se poursuive pas ?
Je vois qu'il existe des signaux de terminaison, c'est ce qui est utilisé ici ?

- Concernant les plasmides : si j'ai bien compris, lorsque l'on veut "découper" une séquence, on l'insère au bon endroit dans le plasmide et les enzymes s'occupent du reste ?

Encore merci pour ce superbe article Eddy !

(Tu va finir par me donner envie d'emprunter cette voie dans quelques temps ! )

[Eddy]

Bonsoir Kévin, le forum,

- Concernant la réaction de PCR, les copies se font donc en sens inverse, mais comment la copie s'arrête-t-elle ?
Par exemple pour le brin 5'->3', l'amorce (GAGACGAATAAGGTCC) permet la copie de la séquence d'intérêt qui se pousuit ensuite à l'autre amorce (TATCAACCCCAAAACTTT) mais comment être sûr que la copie ne se poursuive pas ?

Lors du premier cycle, la copie peut dépasser la séquence de la deuxième amorce. Mais lors des cycles suivants, seul le fragment délimité par les deux amorces est amplifié, de sorte que le fragment plus long devient très largement minoritaire.

Concernant les plasmides : si j'ai bien compris, lorsque l'on veut "découper" une séquence, on l'insère au bon endroit dans le plasmide et les enzymes s'occupent du reste ?

D'abord on découpe (on dit : on digère) le plasmide avec les enzymes de restriction appropriées (à l'emplacement voulu), et ensuite on y insère le fragment d'intérêt et on « referme » (étape de ligation) le tout avec d'autres enzymes (des ligases).

Cordialement,
Eddy

[BelialL]

Merci Eddy pour tes réponses, tout est clair maintenant je pense...

[PierreH]

Bonjour,

bravo pour le boulot, c'est limpide !
mais pourquoi écrire intégralement en italique, extrêmement peu lisible ?

[Eddy]

Bonsoir Pierre, le forum,

mais pourquoi écrire intégralement en italique, extrêmement peu lisible ?

Ça me plaisait bien le Comic Sans MS en italique... mais puisqu'il y a un souci de lisibilité, je vais redresser tout ça d'ici peu. Il n'y a bien sûr aucune intention de ma part de compliquer la lecture...

Cordialement,
Eddy

[Eddy]

Bonsoir le forum,

Voilà, l'italique a disparu.
Désolé pour le désagrément.

Cordialement,
Eddy

[nolwenn]

Merci pour le partage !

[Maraussan]

Formidable !
Seul bémol actuellement : il serait utile de valider ce qui est à l'origine des bugs de mise en forme en format PDF (via la fonctionnalité proposée en haut à droite du site Le Naturaliste).