Mes premiers pas dans le DIC

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Fredlab
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Re: Mes premiers pas dans le DIC

Message par Fredlab »

Hello

Merci pour vos encouragements.
Avant de m'attaquer à du "mobile", je poursuis mes essais.

Suite à une séance de TP avec mes élèves, j'ai monté entre lame et lamelle une racine d'oignon (un squash) colorée à l'orcéine acétique. Le but est de trouver différentes phases d'une mitose.
En DIC, ça donne ça

Image
(en taille originale ICI - j'ai rarement vu aussi bien les chromosomes métaphasiques avec leur deux chromatides)

Image
(40x à immersion + projectif 5x + stack - l'image à 100 % est bien moins intéressante)

Autrement, j'ai fait une préparation de grains de pollen d'Althea.

Image
(coloration à la fuschine + objectif 20x + projectif 5x - stack d'une trentaine d'images - pas de recadrage - le DIC n'ajoute pas grand chose par rapport à un éclairage oblique ou un éclairage normal -> des exemples à suivre)
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PierreH
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Re: Mes premiers pas dans le DIC

Message par PierreH »

salut,

bravo Fred, c'est super net.
Si tu continues comme ça, on va pouvoir en faire le caryotype !
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André
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Re: Mes premiers pas dans le DIC

Message par André »

Bonjour à tous, fred
Ce sont de très belles images, bien piquées!
Mais où sont passées les bacules du grain de pollen d'Althea?
Amicalement
André Advocat

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Fredlab
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Re: Mes premiers pas dans le DIC

Message par Fredlab »

Hello

Encore merci pour vos retours positifs et encourageants 8-)
André a écrit :Mais où sont passées les bacules du grain de pollen d'Althea?
Qu'est-ce ?

J'ai traité ce grains de pollen comme un bourrin :oops:
Je crois que j'ai cassé beaucoup de pointes :?
A d'autres endroits, l'enveloppe a été déchirée, libérant sont contenu, contenu ayant une texture curieuse (prochain post)
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Fredlab
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Re: Mes premiers pas dans le DIC

Message par Fredlab »

Suite...
Fredlab a écrit :
André a écrit :Mais où sont passées les bacules du grain de pollen d'Althea?
Qu'est-ce ?
Je viens de voir cet excellent topic
Je pense que s'il n'y a pas de "bacules", c'est peut-être qu'il y a méprise (de ma part) sur le mot "Althea"... en tout cas, ma fleur de départ n'est pas une Rose trémière, mais un arbuste.

... bon, je m'en vais faire quelques photos supplémentaires...
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Fredlab
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Re: Mes premiers pas dans le DIC

Message par Fredlab »

Suite...

Voici l'Althea en question

Image

La fleur (encore une peu fermée)

Image

et un grain de pollen explosé

Image
(y voit-on des bacules ?)
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Re: Mes premiers pas dans le DIC

Message par pierre4fun »

Superbe travail Fred.
Chapeau.
Amicalement, Pierre
JMP76
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Re: Mes premiers pas dans le DIC

Message par JMP76 »

bonjour,

Je suis admiratif des photos de la mitose! (et du pollen). Je suis surtout étonné de voir cela fait par un amateur. (je sais quand même que dans ce forum, on a des amateurs super qualifiés)
Est-ce uniquement la technique DIC qui permet de voir la mitose, ou bien tout travail soigné avec un matériel honorable qui le permet? Car jusqu'ici, je pensais que cela ne pouvait être obtenu que par des labos, avec un matériel très spécialisé.
Je découvre donc ces possibilités. Et que la mitose n'est plus ce "concept" décrit dans les livres et qu'on peut LA rencontrer!

Encore bravo!
Microscopie avec des BHS (dia/epi LPA, fluo, DIC, IR, capteurs) et analyses théoriques (FTM, spectro, ...)
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Re: Mes premiers pas dans le DIC

Message par Fredlab »

Hello

Encore merci pour vos remarques.

@Jean-Marie, observer des mitoses, c'est du grand classique avec nos élèves.
Il faut prendre un oignon, lui faire tremper le cucul dans l'eau. A priori, après deux ou trois jours, on voit apparaitre des petites racines... c'est ce qu'il faut prélever.
On dépose la racine (quelques mm de long - c'est à la pointe que se font les mitoses), on lui met une goutte d'HCl sur le dos. On tamponne après une dizaine de minutes, puis on met une goutte d'orcéine acétique (ça, je n'ai pas ça chez moi -> prise au labo de mon bahut) et après une vingtaine de minutes, on écrase le tout sous une lamelle (on fait un "squash")
Après, il faut chercher...

Image

8-)
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JMP76
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Re: Mes premiers pas dans le DIC

Message par JMP76 »

Merci pour cette explication: j'adore! car c'est le genre d'explication qui montre que l'expérience est faisable. Et cela donne envie d'essayer... Sache que tu ne perds jamais ton temps à bien expliquer. (Toi, et tous les autres intervenants de ce forum!)

Le DIC ne semble donc pas nécessaire. Et il n'y a pas de découpage en tranche à faire? Juste mettre sous lamelle?

Il faudra un jour que je me penche sur l'achat d'un microscope, le monde à découvrir semble tellement intéressant, mais c'est un domaine que je ne connais pas (la bio), et j'ai trop peur de ne pas suffisamment utiliser le matériel. La seule utilisation d'un microscope que j'ai dû faire pendant mes études, c'était pour la détermination de la charge d'un électron! Assez éloigné de la biologie!

J'espère, au moins, que tu as des élèves passionnés!

cordialement
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