Anneaux de phase

[subido]

Bonjour à tous,

Je possède un ortholux 1 avec un condenseur 402a. J'ai récemment fais l'acquisition d'un objectif leitz PL APO 63x/1.40 phaco4.
Dès l'installation de l'objectif sur le microscope, j'ai cherché à aligner les anneaux de phase avec une lunette de bertrand. A ma grande surprise aucune des postions du condenseur n'est compatible avec mon objectif... snif

Je vais donc devoir installer un anneau compatible dans mon condenseur. L'un d'entre vous a-il été amené a installer un anneau compatible phaco4 dans un condenseur 402a? Si oui, où avez vous acheter cet anneau de phase?
Sur ebay, j'ai trouvé cela:
http://www.ebay.fr/itm/Microscope-Phase ... SwImRYkDrc
Cela pourrait-il faire l'affaire?

Si non, avez vous un tuto sous la main pour faire un anneau de phase maison?

Merci!!!!!

[speculoos]

Bonjour Thomas

il s'agit de l'anneau 4 , pas vraiment courant mais tu peux aussi le fabriquer

pour un vieux Reichert,
j'en ai refait avec des lamelles du bon diametre ( ici ronde 18 mm) fournies par un microscopiste amateur
j'ai découpé mes anneaux dans une matiere fine, stable et opaque ( surface magnetique de disquette) collée au vernis à ongle
le tout fignolé et aligné sous loupe !

NB : je me suis aidé d'un cutter circulaire qui n'est rien d'autre qu'un compas avec une lame de scalpel !

[Fredlab]

Hello

Le lien fait partie des solutions connues, mais compte-tenu de la super ON de ton objectif (les joies de l'apochromatisme), il n'est pas dit qu'il y ait un disque qui corresponde. (déjà être sûr du diamètre)
Il me semble avoir vu passer dans les discussions récente un (ou des) lien(s) vers le moyen de faire des disques de phase DIY.

(le temps de taper mon message et Didier m'a devancé)

[subido]

Merci pour ces réponses quasi immédiates !

@speculoos. Merci pour les conseils. Cependant, quel patron utilises tu? Pour reformuler la question, comment détermines tu le diamètre de l'anneau qu'il faut découper?

@Fredlab. Les anneaux originaux du condenseur 402a font 18mm. Cependant, il y a un décochement dans la tranche des anneaux pour les maintenir en place dans le condenseur avec un système de billes + ressort. S'il n'y a pas ces décochements sur les anneaux vendus sur ebay, ça ne passera pas. Si tu retrouves un tuto DIY complet, je suis preneur!

[speculoos]

Les dimensions sont précisées dans le la fiche du lien eb** cité

[subido]

@speculoos. Malheureusement, je ne pense pas. Je viens de mesurer le diamètre de l'anneau de phase 3 du condenseur 402a. Il fait environ 14mm. C'est très différent de l'anneau vendu comme PH3 dans le lien ebay.

[subido]

J’ai découpé des anneaux de phase de plusieurs dimensions dans du papier canson en utilisant une petite machine de découpe pilotée par ordinateur. Par cette méthode, j’ai pu déterminer la taille de l’anneau de phase phaco4. Pour ceux que cela pourra intéresser :
Diamètre du disque : 20 mm
Diamètre de l’anneau de phase (au centre) : 9,5 mm
Epaisseur de l’anneau de phase : 1 mm
Pour tester l’objectif en contraste de phase, j’ai observé un champignon que j’ai glissé entre lame et lamelle (voir photo). Donnez-moi votre avis et les améliorations possibles !
J’ai constaté quelque chose d’assez étonnant. Lorsque j’observe un sujet avec la caméra (montée sur la tête trino de mon ortholux) en utilisant l’objectif 63x en phase, je vois parfois apparaitre deux anneaux de phase à l’image ! S’agit-il d’un reflet des anneaux de phase de l’objectif et du condenseur ? Comment puis-je l’éviter ?

[speculoos]

Bonjours Thomas,

comme souvent, je vais faire hurler, mais pour comparer et apprécier, il faudrait plutôt un specimen reference, fin et non opaque

genre cellule buccale ou labiale (grattage et fixation sur lame )

c'est simple à faire et les images sont pléthores

deuxio, il faudrait comparer avec un autre grossissement disponible sur ton microscope en CP ( 20 X par exemple)

[Fredlab]

Hello

Je ne suis pas un spécialiste du CP (j'ai eu des condos pour CP, mais j'ai basculé dans le DIC), je trouve ça pas si mal.
Merci pour le partage.

[Bernard-J]

Bonsoir Thomas, tous,

Génial,l'anneau de phase en carton!

En voyant la couleur bleue de ta photo, je suppose que tu as une préparation colorée au bleu trypan ou autre colorant?
Pour tester le CP, il ne faut pas colorer la prep, car justement le CP est fait pour révéler les objets transparents qui présentent des différences de réfraction par rapport au milieu ambiant. Le CP transforme des différences de phase en différences d'amplitude de la lumière, d'où le contraste obtenu malgré l'absence de coloration.

Je plussoie avec Didier: pour tester ton CP, essaie avec des cellules épithéliales buccales. Frotte l'intérieur de ta joue avec ton doigt et dépose avec une goutte de salive sur la lame. Inutile de fixer ! Y-a pas plus simple.

Lequel du contraste de phase ou du contraste interférentiel est le meilleur ? Ainsi posée, cette question n'a pas de sens. Cela dépend évidemment de la qualité des systèmes à disposition, mais surtout du type de préparation et de ce qu'on veut observer.

Pour les champi, comme ton exemple, le DIC donnera le plus souvent un meilleur résultat à cause du volume des hyphes, nuisible pour le CP. Et en règle générale, les bactéries sortent mieux en CP qu'en DIC. Avec des volumes et des structures de surface, le DIC est mieux que le CP.
Ma photo en CP ci-dessous n'est pas bien meilleure que la tienne...

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Dans le cas ci-dessous, par contre, les hyphes "vides" sortent aussi bien avec le CP, mais les spores mieux avec le DIC. J'ai oublié de corriger la temp de couleur de la camera pour la dernière photo.

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