Le Naturaliste

Bonjour,
Je m'adresse à vous car vous êtes probablement les meilleurs connaisseurs dans le domaine de la coloration de de coupes végétales.

Je fais de la recherche sur le lin, plus particulièrement sur les fibres, qui sont regroupées en faisceaux. Je dois au cours d'un stage déterminer la composition du faisceau de fibres et la répartition des molécules dans le faisceau.

Je me rappelle avoir fait durant mes études de biologie des colorations au carmin vert d'iode, mais mon expérience reste très limitée dans le domaine.

J'ai fabriqué des coupes de faisceau au microtome, et cherche à localiser ou se trouvent les celluloses, hémicelluloses, lignines, pectines, composés lipidiques (cires, graisses).

Connaissez vous des colorants qui colorent ces composés?
Voici ce que j'ai pu lire sur le net :
lignine : vert d'iode
cellulose : carmin aluné ou rouge congo
pectines : rouge de ruthénium, bleu de molybdène, violet neutre de casella
cires : ???

Quels colorants me conseillez vous et savez vous ou je peux me les procurer?
Pour ne pas mélanger deux colorants sur une même coupe, j'ai la possibilité de faire des coupes très proches les une des autres et de colorer chaque lamelle avec un seul colorant à la fois.

Merci pour votre aide!

Antoine BARBULEE, CNRT, CAEN

Hello

Je ne sais pas si c'est un post en réaction à la nouvelle chronique de Bernard, postée ICI en collection, mais il m'est avis que tu pourrais lui demander directement

Bonjour.
Pour les pectines le rouge de ruthenium va bien (il est cher).
Si on veut avoir une localisation précise des composants de la paroi il vaut mieux s'orienter vers des anticorps spécifiques couplés à un fluorochrome ou mieux à un enzyme car il y aura surement des problèmes d'autofluorescence dans le cas des fibres ou à des particules d'or colloïdal (microscopie électronique). On doit trouver cela dans le commerce. Il est bien de commencer par la microscopie optique avant d'aborder la microscopie électronique.
Amitiés. Bernard.

Antoine :
Je fais de la recherche sur le lin...

Bonsoir,
recherche en amateur, ou bien en professionnel ?
En professionnel, il me semble que le sujet est traité par un ouvrage récent, de langue anglaise ...

Merci pour vos réponses,
je suis en fait en stage ingénieur de fin d'études dans un labo, je dois caractériser la fibre de lin, je dirais que c'est de la recherche professionnelle qui se transforme en de la recherche amateur, vu les moyens qu'on me met à disposition. Je vais donc tenter de me procurer des colorants, ça me semble plus facile à trouver et moins cher qu'un marquage avec des anticorps.

je réussi à trouver du rouge carmin et du vert d'iode, je vais faire des premières colorations de coupes cette semaine.

Maraussan a écrit : Bonsoir,
recherche en amateur, ou bien en professionnel ?
En professionnel, il me semble que le sujet est traité par un ouvrage récent, de langue anglaise ...

Maraussan, aurais tu plus de precision sur cet ouvrage, j'ai fais quelques recherches mais ne parviens pas à le trouver....


Aussi, sauriez vous ou je peux acheter de tels colorants?

Merci!

J'ai cherché les références sans plus de succès, pour finalement me souvenir qu'il s'agissait d'un ouvrage hors-commerce d'un fabricant de réactifs aux US. Mais lequel ?

Etant donné que tu n'es pas équipé en fluorescence, il te faut contacter des spécialistes des réactifs standards utilisés en histologie.
En France, par exemple RAL
http://www.reactifs-ral.fr/diagnostic/fr/V-HIS.php5
Aux USA, par exemple Sigma-Aldrich
http://www.sigmaaldrich.com/analytical- ... gents.html
En Allemagne, par exemple Chroma
http://www.diagonal-shop.de/

J'espère qu'ils pourront t'aiguiller.
Reste les mamouths et leurs laboratoires, l'INRA, le MNHN etc ...
Et également contacter la Société Nationale d'Horticulture de France, avec sa liste de Labos phyto agréés...